CellTiter 96® 非放射性细胞增殖检测试剂盒是由一组可以快速方便地测定活细胞数量的试剂组成的。 该 CellTiter 96® 试剂盒经Mosmann 描述的 MTT 分析法改良而来,并引入了一些改良方法,来克服该方法以往遇到的问题。这些问题包括:1) 加入有机溶剂后引起的血清蛋白沉淀; 2) 酚红干扰;3) 甲 结晶的不完全溶解导致灵敏度下降;4) 有色产物的稳定性。使用 CellTiter 95® 试剂盒时,向培养板内加入预混合的、经过优化的染料溶液,培养孔中通常含有不同浓度的生长因子或待测物在 4 小时的孵育时间里,活细胞将染料溶液中的 MTT 四唑化合物转变成甲 产物。如果您目前正在使用 [3H]- 胸腺嘧啶掺入检测,可在通常需加入放射性胸腺嘧啶时加入 CellTiter 96® 试剂作为替代,然后将溶解 / 反应终止液加入培养基中以溶解甲 产物,此时在 570nm处的光吸收率即可被 96 孔读板仪记录下来。 另外,用 [3H]- 胸腺嘧啶掺入法和四唑盐转化法检测几种样品中生长因子的浓度,直接比较的结果表明两种方法测定的数据误差小于 4%。