DNA Polymerase I (DNA 聚合酶 I) 催化以模板引导的方式 将核苷酸按 5' → 3' 的方向掺入到双链 DNA 的聚合反应。DNA Polymerase I 具有 3' → 5' 外切酶活性或 " 纠错 " 功能 , 降低了 DNA 复制过程中的错误率。它还具有 5' → 3' 外切酶活性，使它能够通过缺口翻译替换正在合成的 DNA 中的核苷酸。 该酶从重组 E. coli 中 纯化，能够催化重新合成同质多聚体并提供了制备各种性质明确的 DNA 底物的方便方法。