DNA Polymerase I Large (Klenow) Fragment (DNA 聚合酶I 大(Klenow) 片段) 是DNA 依赖的DNA 聚合酶，它没有完整的E. coli DNA Polymerase I 所具有的 5' → 3' 外切酶活性，但保留了5' → 3' 聚合酶、3' → 5' 外切酶及链置换活性。该酶是DNA 聚合酶I 的C- 末端片段，68kDa。Klenow 片段5' → 3' 聚合酶活性经常被用于以非标记的或标记的dNTPs 补平5'- 突出端、单链或双链DNA 模板测序、合成寡核苷酸进行体外突变、cDNA第二链合成以及制备单链DNA探针。3' → 5' 外切酶活性可用于从3'- 突出端产生平末端。