NanoBRET™ 技术是一种改良的生物发光荧光共振转移技术(BRET),使用最新型的专利报告基因NanoLuc® 萤光素酶作为BRET的能量供体,HaloTag 标签蛋白标记的NanoBRET™ 618 荧光配基作为能量受体,用来检测活细胞中蛋白间的相互作用。NanoBRET™Protein:Protein Interaction (PPI) Assays 使用NanoLuc® 萤光素酶和HaloTag® 标签蛋白来与目标蛋白构成融合蛋白,使检测更加灵敏,可重复性更高。低水平表达全长的蛋白的方法使PPI 监测和筛选研究能反映出真实细胞内的生理功能。 NanoBRET™ PPI Starter Systems 包含了用于构建NanoLuc®萤光素酶和HaloTag® 标签融合蛋白的载体,NanoBRET™ PPIPositive Control Pair (p53, MDM2) 和用于荧光能量受体的HaloTag®NanoBRET™ 618 配基。 • MCS Starter System:使用传统的多克隆位点(MCS) 方法克隆构建N 端和C 端NanoLuc® 萤光素酶和HaloTag® 标签融合蛋白。 • Flexi® Starter System:使用Flexi® 载体克隆系统来构建N 端和C 端NanoLuc® 萤光素酶和HaloTag® 标签融合蛋白,一种基于稀有限制性内切酶SgfI 和PmeI 进行定向克隆的方法,能够在Flexi®载体间更加快速,高效,高保真地进行蛋白编码区转移,而无需重新测序。 Promega公司拥有NanoLuc®萤光素酶(又称NanoLuc®荧光素酶)及底物相关专利。 NanoLuc®萤光素酶专利如下: 专利号:ZL 2010 8 0019477.4;专利公告号:102459579 NanoLuc®萤光素酶底物(Furimazine)的专利如下: 专利号:ZL 2011 8 0063659.6;专利公告号:103443121 专利号:ZL 2011 8 0062485.1;专利公告号:103370319 注意:使用NanoLuc®产品,研究人员需同意接受本有限使用商标许可条款(LULL)的约束,否则视为侵犯专利权。