三种pBiT3.1 HiBiT Vectors 经过设计，可将11 个氨基酸的HiBiT 肽段标签与目的蛋白的氨基端或羧基端相连接。这些载体包含多克隆位点，可用于制备HiBiT 融合蛋白。pBiT3.1 Vectors 适用于稳定和瞬时的基因表达，并编码卡那霉素和新霉素抗性，分别适合细菌和哺乳动物细胞中的筛选。目的蛋白与HiBiT 标签之间的接头长度可以灵活选择，具体取决于所使用的限制性内切酶。 • pBiT3.1-N [CMV/HiBiT/Blast] Vector 将HiBiT 标签添加到目的基因的N 端。插入片段的3’端应含有终止密码子，以便终止翻译。 • pBiT3.1-C [CMV/HiBiT/Blast] Vector 将HiBiT 标签添加到目的基因的C 端。注意：插入片段不应当编码终止密码子，而目的基因应含有正确的翻译起始序列，包括N 端的ATG 密码子或Kozak 序列。 • pBiT3.1-secN [CMV/HiBiT/Blast] Vector 将HiBiT 标签添加到成熟的跨膜或分泌蛋白的N 端。 这种载体在HiBiT 标签的N 端编码IL-6分泌信号肽，可将带HiBiT 标签的蛋白直接运输至哺乳动物细胞的质膜，实现细胞表面表达或分泌。注：插入片段的3’端应含有终止密码子，以便终止翻译。 HiBiT 肽段标签，与Nano-Glo® HiBiT 检测系统结合使用，可对目的蛋白实现生物发光检测。这样无需使用抗体，即可利用生物发光法对蛋白进行定量。