TSAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase (TSAP 热敏感 碱性磷酸酶 ) 可以催化 DNA 的 5'- 末端去磷酸基团，阻止线性化的克 隆载体 DNA 在连接反应中重新环化及再连接；对于 3' 突出端、5' 突 出端及平末端都具有活性。也可通过5' 末端磷酸基团的脱磷酸来制 备 5' 末端标记 DNA。 TSAP 在 74℃加热 15 分钟会发生不可逆的失活。因此在连接反 应之前不需要纯化DNA。 在多种条件下测试，TSAP 在所有的限制 性内切酶反应缓冲液中都具有活性，这有利于限制性酶切反应、去磷 酸化和连接反应的连续进行。